se familiariser avec tous les termes scientifiques utilisés en microscopie et l'imagerie de fluorescence . Si vous n'êtes pas familier avec la microscopie avancée , la fluorescence et de la terminologie scientifique , il est impératif que vous cherchez des tutoriels ou des cours formels dans la science . En outre, vous devez être familier avec les composants d'un microscope . Microscopie à fluorescence inversé est totalement inadapté pour les débutants ou les profanes .
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commutateur sur le pouvoir de la source de lumière de champ lumineux, l'appareil photo et la source de lumière UV pour la détection du signal de fluorescence ultérieure . Placez un blocage ou d'un filtre sombre pour écarter la lumière UV avant d'être prêt à utiliser pour l'imagerie de fluorescence .
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Placez la diapositive contenant l'échantillon sur la scène et le fixer avec les goupilles de support de diapositives . Réglez le condenseur à "Bright -Field " pour les échantillons colorés ou d'histologie de sorte qu'ils sont visibles sous lumière blanche ou « contraste de phase » pour échantillons non colorés . Cherchez l'échantillon en utilisant l'oculaire .
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Pour réduire l'intensité lumineuse champ lumineux , insérer ou modifier des filtres de densité neutre qui sont fournis avec le microscope . Être adaptées à l'intensité lumineuse appropriée . Réglez l'agrandissement de l'échantillon consulté en tournant lentement l'amende et les boutons de réglage grossier jusqu'à la résolution de l'échantillon est beau et clair . Il devrait y avoir aucune décoloration ou d'autres anomalies de la réfraction de rayons lumineux .
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allumer l'appareil photo ( dans la plupart des microscopes , il n'y a aucune façon de le faire autre que de lancer le logiciel ) à ce que la capture d'image et un logiciel d'analyse a été installé par le fabricant de l'ordinateur fixée au microscope . Définissez les paramètres de l'échelle , grossissement , objectifs , etc Réglez le logiciel puis de " Imaging Live" dans "Bright - Field. "
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Lorsque l'échantillon est prêt , éteignez la source de lumière et allumer le fluorescent ( UV ) de la source de puissance lumineuse . Encore une fois, faire des ajustements à l' intensité de la puissance UV pour augmenter ou diminuer le signal de fluorescence de l'échantillon.
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Lorsque l'échantillon est prêt à être photographié , changer le logiciel de " Imaging Live" à « image Acquisition . " Définir la taille appropriée de l'ouverture , le temps d'exposition , la concentration et d'autres paramètres requis . Notez que quelle que soit l'image est observée par l'oculaire ne sera pas le même que celui en cours d'acquisition par la caméra et consulté sur le logiciel de l'ordinateur. Profonds ajustements des paramètres , tels que la mise au point et l'intensité de fluorescence , seront toujours nécessaires .
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