Protocoles de microscopie
Les protocoles de microscopie sont utilisés en biosciences pour observer cellules, tissus et micro-organismes. Tous les microscopes ne se valent pas. Les microscopes optiques (ou « optiques ») utilisent lentilles et lumière pour grossir. Certains protocoles de microscopie optique impliquent matériaux fluorescents et échantillons congelés. Alors qu'un microscope optique grossit jusqu'à 2 000 fois, un microscope électronique permet des grossissements de 2 millions de fois, utilisant un faisceau d'électrons au lieu de lumière visible. Les protocoles de microscopie électronique incluent la fixation de protozoaires, entre autres.
Protozoaires pour microscopie électronique
Les protozoaires ciliés sont des organismes microscopiques à filaments externes. Le microscope électronique est l'instrument idéal pour les observer, après un processus de fixation utilisant des substances chimiques comme le tétroxyde d'osmium et l'acétate d'uranyle. Selon Protocol Online, après fixation, les cellules sont déshydratées à l'éthanol et séchées. Ce protocole permet l'observation des filaments de protozoaires au microscope électronique.
Microscopie d'immunofluorescence
Les protocoles de microscopie d'immunofluorescence sont souvent utilisés avec un microscope optique, des molécules appelées anticorps, et des produits chimiques fluorescents. Ils servent à observer cellules isolées et tissus, qui doivent être préparés avant observation. On utilise dans la solution : phénylènediamine, glycérol, bodipy phallacidine, carbonate-bicarbonate, et un anticorps de souris appelé tubuline. Cette préparation rend certains composants cellulaires fluorescents, facilitant l'observation.
Cryosections semi-minces pour microscopie optique
Selon le Ahmanson Center for Advanced Electron Microscopy and Imaging, le matériel biologique congelé se sectionne mieux à -90 °C (-130 °F), préservant les détails cellulaires. Les échantillons sont immergés dans azote liquide et saccharose. La coupe est faite avec un cryo-ultramicrotome, qui coupe des sections trois fois plus fines qu'une toile d'araignée. L'échantillon est déposé sur lame et enduit de gélatine, d'une enzyme (poly-L-lysine) ou du colorant bleu alcian.