Méthodes d'électrophorèse

L'électrophorèse désigne des méthodes utilisées en biochimie pour séparer les acides nucléiques ADN et ARN, ainsi que des fragments de protéines. Largement employées en génétique légale et tests de paternité. Elle consiste à placer les échantillons analysés sur un gel ou dans une solution capillaire électrifiée. L'affinité électrique fait que les fragments courts migrent le plus loin, tandis que les plus longs restent près de l'origine. Méthodes : gel d'agarose, capillaire, gel de polyacrylamide.

Électrophorèse sur gel d'agarose

L'agarose est un gel naturel extrait d'algues (Dolan DNA Learning Center). Une solution d'agarose avec bromure d'éthidium est déposée sur le plateau d'électrophorèse. Attente 20 min, puis coloration des échantillons protéiques appliqués sur le gel. Un champ électrique de 50 à 150 volts traverse le gel, séparant les protéines en petits fragments.

Électrophorèse capillaire

Alternative à l'électrophorèse sur gel. Souvent utilisée pour l'analyse de fragments d'ADN, nécessitant moins de temps et de plus petits échantillons. Selon Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry, un tube capillaire relie deux solutions de charges opposées au lieu du gel. L'échantillon d'ADN est mis dans une solution, puis migre à travers le capillaire.

Électrophorèse sur gel de polyacrylamide

Le gel de polyacrylamide contient des substances toxiques pouvant endommager les cellules nerveuses. Port de gants indispensable. Selon Protocol Online, cette méthode offre des résultats plus précis et l'analyse d'échantillons plus gros. Une solution de gel polyacrylamide est placée entre deux plaques de verre, isolée de l'oxygène. La taille du plateau de verre varie de <10 pouces à 40 pouces selon le niveau de séparation moléculaire requis.