Fonctionnement d'un microscope confocal

Les scientifiques utilisent les microscopes confocaux pour obtenir des images 2D et 3D d'échantillons. Ils éliminent efficacement la lumière de fond, permettant de voir des images nettes à haute résolution.

Contexte

Le microscope confocal génère des images basées sur le principe de fluorescence. Quand une lumière de haute intensité (laser) brille sur l'échantillon, celui-ci émet une lumière de couleur différente. Un tube photomultiplicateur détecte cette lumière émise et l'envoie à un ordinateur pour analyse. La fluorescence peut faire émettre de la lumière à tout l'échantillon, créant une brume de fond dans l'image.

Conception

La clarté des images vient du concept de points focaux conjugués, d'où le nom. Le microscope a un ensemble de lentilles par où passe la lumière de l'échantillon. Des images peuvent se former à différents points, mais seuls ceux venant du point focal de la lentille sont nets. Un écran avec un trou minuscule (sténopé) est placé au point focal de l'objectif (point conjugué), bloquant efficacement la lumière de fond. Cela permet de ne voir que la lumière venant du point focal.

Création d'images

Les microscopes confocaux ne peuvent se focaliser que sur un point de l'échantillon à la fois. Le microscope doit balayer une série de points pour générer une image. En balayant différents points dans plusieurs plans, l'ordinateur peut reconstruire une image 3D de l'échantillon.