Quelle est la profondeur de champ sur un microscope ?

La profondeur de champ (DOF) d'un microscope est la plage de distances par rapport à l'objectif à laquelle les objets apparaissent avec une netteté nette. Elle est déterminée par l'ouverture numérique (NA) de l'objectif et la longueur d'onde de la lumière utilisée.

Le DOF est inversement proportionnel au NA, ce qui signifie qu'un objectif à NA plus élevé a un DOF plus petit. En effet, un objectif à NA plus élevée a un cône de lumière plus étroit, ce qui signifie qu'il se concentre sur une zone plus petite de l'échantillon.

Le DOF est également inversement proportionnel à la longueur d’onde de la lumière, ce qui signifie qu’une longueur d’onde de lumière plus courte a un DOF plus petit. En effet, les longueurs d'onde plus courtes de la lumière sont plus facilement diffractées, ce qui signifie qu'elles se propagent davantage lorsqu'elles traversent l'objectif.

Le DOF d'un microscope est important car il détermine l'épaisseur de l'échantillon qui peut être visualisé avec une mise au point nette. Un spécimen plus épais que le DOF apparaîtra flou ou flou.

Le DOF peut être augmenté en utilisant un objectif à NA inférieur ou en utilisant une longueur d'onde de lumière plus longue. Cependant, cela diminuera également la résolution du microscope. Par conséquent, il est important de trouver un équilibre entre le DOF et la résolution lors du choix d’un objectif pour une application particulière.

Le DOF d'un microscope peut être calculé à l'aide de la formule suivante :

$$ DOF =\frac{2(n/NA)^2}{\lambda} $$

Où:

* DOF est la profondeur de champ en micromètres

* n est l'indice de réfraction du milieu d'immersion

* NA est l'ouverture numérique de l'objectif

* λ est la longueur d'onde de la lumière en micromètres