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Avantages et inconvénients du microscope optique

Les avantages et inconvénients du microscope optique concernent la lumière, le grossissement et la résolution. Les microscopes optiques grossissent la lumière visible — avantage évident, c'est ce que nos yeux voient. Grossissement (taille apparente) et résolution (clarté des détails) sont tous deux limités.

Source lumineuse

Les microscopes optiques utilisent soit un miroir réfléchissant, soit une lumière électrique pour diriger la lumière à travers le spécimen vers le système de lentilles. Les systèmes à miroir sont moins coûteux, mais nécessitent un bon éclairage ambiant et plus de patience pour ajuster. Les systèmes électriques sont plus chers et nécessitent une prise proche, mais sont plus simples à utiliser.

Intensité lumineuse

L'intensité (brillance) est importante car la lumière traverse le spécimen. Les spécimens fins et translucides se voient mieux à faible intensité ; les spécimens épais et opaques nécessitent plus de lumière. Inconvénient : certains spécimens sont trop épais/opaques pour être vus.

Les spécimens très fins ou translucides peuvent être colorés pour augmenter le contraste. Mais ce processus tue les spécimens vivants.

Ajustement de l'intensité lumineuse

Le diaphragme, au-dessus de la source lumineuse et sous la platine, ajuste la lumière traversant le spécimen. Deux types : sélecteur à ouvertures fixes et diaphragme à ouverture réglable type appareil photo.

Le diaphragme à ouvertures fixes a plusieurs ouvertures de tailles différentes sur une plaque tournante. On sélectionne en tournant. Moins cher, mais contrôle moins précis.

Les diaphragmes à ouverture réglable offrent une taille d'ouverture continûment variable, comme le diaphragme d'un objectif photo (f-stop), pour un contrôle plus précis. Plus coûteux.

Grossissement

Plus grand n'est pas toujours mieux. Les microscopes optiques grossissent bien jusqu'à 1000x. Au-delà, l'image devient de plus en plus déformée et floue. La taille accrue ne fait plus une meilleure image, la rend inutilisable.

Jusqu'à 1000x, on voit tous types d'organismes vivants, jusqu'aux plus petites bactéries. Puissant pour étude de types cellulaires, eau de mare, échantillons de sol, où un aperçu des micro-organismes est souhaité. Moins utiles pour structures sous-cellulaires, à cause des limites de résolution inhérentes à l'utilisation de la lumière.

Résolution

La résolution mesure la clarté des détails fins dans une image. Faible résolution = floue. Haute résolution = nette, claire, détaillée. Le plus grand inconvénient des microscopes optiques est leur limite de résolution. Au-delà de ~1000x, ils perdent vite la capacité de résoudre les détails fins. Cela vient des propriétés physiques de la lumière, pas de la qualité de l'instrument. Pour détails sous-cellulaires, il faut d'autres technologies comme les microscopes électroniques.

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