Pourquoi l'échantillon au microscope doit-il être très fin ?

Un microscope de laboratoire standard fait passer la lumière à travers un échantillon monté sur lame. Celui-ci doit être très fin pour laisser passer la lumière avec puissance et sans distorsion, et permettre à la lamelle de couvre-objet de reposer uniformément.

Objectif

Un microscope standard montre le détail en une seule dimension ; l'épaisseur n'est pas nécessaire. Un système différent est requis pour la 3D.

Passage de la lumière

Pour une image nette, la lumière doit traverser l'échantillon avec intensité. Elle ne peut le faire puissamment au-delà de quelques couches cellulaires.

Calibrage

Une lame et une lamelle ensemble font 1 à 1,4 mm d'épaisseur. Les microscopes sont calibrés pour compenser la déviation de la lumière dans cet ensemble. Un échantillon épais dérègle ce calibrage et distord l'image.

Espace de travail

Aux forts grossissements, l'espace entre l'objectif et la lame est minime. Un échantillon épais risque d'être écrasé par l'objectif.

Lamelle de couvre-objet

Il est déconseillé d'utiliser un échantillon épais sans lamelle. Celle-ci est cruciale pour corriger la déviation de la lumière, surtout au-delà de 20×.